显微镜的几个重要光学技术参数

 
　　显微镜有以下几个重要的光学技术参数：数值孔径，分辨率，放大率，焦深，视场直径，工作距离等，这些参数不都是越高越好，它们互相关系又互相制约，购买时要根据检查实际需要，选取匹配的参数，这样才达到最好的效果。
一、数值孔径（N.A.）
　　 数值孔径是判断物镜性能（分辨率，焦深和亮度）的关键要素。
数值孔径（N.A.）以下式计算。                    
N.A.=n×sinx
n =试样与物镜之间介质的折射率（空气：n=1,油：n=1.515）
X:光轴与离物镜中心最远折射光形成的角度。
　　显微镜观察时，若想增大NA值，孔径角是无法增大的，唯一的办法是增大介质的折射率n值。基于这一原理，就产生了水浸系物镜和油浸物镜，因介质的折射率n值大于一，NA值就能大于一。
　　数值孔径最大值为1.4，这个数值在理论上和技术上都达到了极限。目前，有用折射率高的溴萘作介质，溴萘的折射率为1.66,所以NA值可大于1.4。 
　　这里必须指出，为了充分发挥物镜数值孔径的作用，在观察时，聚光镜的NA值应等于或略大于物镜的NA值
　　数值孔径与其他技术参数有着密切的关系，它几乎决定和影响着其他各项技术参数。它与分辨率成正比，与放大率成正比，与焦深成反比，NA值增大，视场宽度与工作距离都会相应地变小。
二.分辨率
　　分辨率又称“鉴别率”，“解像力”。是衡量显微镜性能的又一个重要技术参数。
　　 显微镜的分辨率用公式表示为：d=l/NA
　　式中d为最小分辨距离；l为光线的波长；NA为物镜的数值孔径。可见物镜的分辨率是由物镜的NA值与照明光源的波长两个因素决定。NA值越大，照明光线波长越短，则d值越小，分辨率就越高。
　　要提高分辨率，即减小d值，可采取以下措施
1、 降低波长l值，使用短波长光源。
2、曾大介质n值和提高NA值（NA=nsinu/2）。
3、增大孔径角。
4、增加明暗反差。
三、放大率
　　放大率就是放大倍数，是指被检验物体经物镜放大再经目镜放大后，人眼所看到的最终图象的大小对原物体大小的比值，是物镜和目镜放大倍数的乘积。
　　放大率也是显微镜的重要参数，但也不能盲目相信放大率越高越好，在选择时应首先考虑物镜的数值孔径。
四、焦深
　　焦深为焦点深度的简称，即在使用显微镜时，当焦点对准某一物体时，不仅位于该点平面上的各点都可以看清楚，而且在此平面的上下一定厚度内，也能看得清楚，这个清楚部分的厚度就是焦深。焦深大,
　　可以看到被检物体的全层，而焦深小，则只能看到被检物体的一薄层，焦深与其他技术参数有以下关系：
   1、焦深与总放大倍数及物镜的数值孔镜成反比。
   2、焦深大，分辨率降低。
　　由于低倍物镜的景深较大，所以在低倍物镜照相时造成困难。在显微照相时将详细介绍。
 五． 视场直径（Field of view）
　　观察显微镜时，所看到的明亮的原形范围叫视场，它的大小，是由目镜里的视场光阑决定的。
　　视场直径也称视场宽度，是指在显微镜下看到的圆形视场内所能容纳被检物体的实际范围。视场直径愈大，愈便于观察。
由公式可看出：
   1、视场直径与视场数成正比。
   2、增大物镜的倍数，则视场直径减小。因此，若在低倍镜下可以看到被检物体的全貌，而换成高倍物镜，就只能看到被检物体的很小一部份。
 六、工作距离
　　工作距离也叫物距，即指物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离。镜检时，被检物体应处在物镜的一倍至二倍焦距之间。因此，它与焦距是两个概念，平时习惯所说的调焦，实际上是调节工作距离。
　　在物镜数值孔径一定的情况下，工作距离短孔径角则大。
　　数值孔径大的高倍物镜，其工作距离小。
七、覆盖差
　　显微镜的光学系统也包括盖玻片在内。由于盖玻片的厚度不标准，光线从盖玻片进入空气产生折射后的光路发生了改变，从而产生了相差，这就是覆盖差。覆盖差的产生影响了显微镜的成响质量。
　　国际上规定，盖玻片的标准厚度为0.17mm,
　　许可范围在0.16—0.18mm.,在物镜的制造上已将此厚度范围的相差计算在内。物镜外壳上标科的确0.17,即表明该物镜要求盖玻片的厚度。 


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